企業(yè)名稱:淄博道麥遜絕緣子股份有限公司
聯(lián)系人:孫經(jīng)理
電話:0533-5792823
手機:13864312352
郵箱:suntengyue@zbdms.com
傳真:0533-5781150
網(wǎng)址:cypx8.cn
地址:淄博市淄川區(qū)昆侖鎮(zhèn)蘇王村1號
絕緣子序列通常位于啟動子和調(diào)控元件之間,具有隔絕其他調(diào)控元件對基因的活化或失活效應的功能。在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品開發(fā)時,如果能夠在插入位置兩側(cè)加入絕緣子序列,則可以起到穩(wěn)定外源基因表達、降低位置效應的作用。在植物中應用最廣泛的絕緣子序列就是核骨架/核基質(zhì)結(jié)合區(qū)(S/MAR)。
為了挖掘測試有價值的絕緣子序列,研究人員找到了4個絕緣子序列,分別是煙草根特異基因Rb7附近的MAR序列,雞溶菌酶MAR序列(chiMARs),矮牽牛轉(zhuǎn)化加速序列TBS和擬南芥第四染色體中的MAR序列(AtS/MAR10),其中前3個絕緣子序列之前有過研究。將包含這些絕緣子序列的測試載體轉(zhuǎn)化擬南芥,并測定外源基因表達。結(jié)果顯示,4個絕緣子序列均能夠增強外源基因表達,而只有AtS/MAR10序列還能夠降低基因表達的變動幅度。
研究人員還利用全基因組測序的方法分析了側(cè)翼包含絕緣子的T-DNA序列的整合情況,發(fā)現(xiàn)chiMARs能夠有效的保護T-DNA的插入不受到周圍染色質(zhì)抑制信號的影響。此外,研究者還發(fā)現(xiàn),在含有絕緣子的轉(zhuǎn)化體中,T-DNA區(qū)截短和載體骨架插入的頻率更高,這表明右邊界RB的插入精準度有所降低,不過基因的表達并未因此受到影響。綜合所有結(jié)果,Rb7序列在增強表達上效果最好,AtS/MAR10序列在降低表達變動幅度上效果最好。